心包积液-肝炎综合征（Hydropericardium hepatitis syndrome，HHS）是主要由血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4，FAdV-4)引起的一种高度传染性和高死亡率的新型家禽疾病。FAdV-4感染的家禽出现急性死亡，死亡高峰集中在1周之内,死亡家禽出现典型的心包积液以及包涵体肝炎症状。此外，FAdV-4感染能够导致宿主的免疫抑制，由此导致的免疫失败、继发威染、混合感染进一步加剧了心包积液-肝炎综合征（HHS）的危害。FAdV-4可感染鸡、鸭、鸵鸟等，主要感染鸡，尤其是3-7周龄肉鸡。

 目前针对FAdV-4 的检测方法有限制性内切酶（REA）、DNA探针原位杂交、聚合酶链式反应(PCR）、实时荧光定量PCR和高分辨率熔解曲线(HRM)、琼脂扩散实验和酶联免疫吸附试验等。但目前的检测方法仍不能满足临床检测需求，其敏感性和特异性还有待进一步提高。ELISA检测方法操作简单，特异性好且成本低，在临床上应用广泛，适用于大批量检测。然而常规的ELISA检测方法主要是检测 FAHV-4的结构蛋白抗体，结构蛋白的抗体既可以通过免疫获得，也可以由自然感染而引起，因此不能区分灭活疫苗免疫的动物和自然感染动物，无法及时发现和清除自然感染动物。

100K蛋白是FAdV-4主要的非结构蛋白之一，不构成病毒粒子的结构，但在病毒的感染和复制过程中发挥重要作用。100K蛋白在感染后期大量表达，会刺激动物机体产生大量的结构蛋白和非结构蛋白抗体，而灭活疫苗中除去绝大部分非结构蛋白，因此灭活苗免疫的动物体内不产生或很少产生非结构蛋白的抗体，感染动物与灭活苗免疫动物体内非结构蛋白抗体水平存在差异，可通过检测非结构蛋白抗体来识别自然感染的动物，为HHS疫病的防控提供可靠、有效的手段。

本发明公开了用于检测FAdV-4的重组蛋白、试剂盒及ELISA检测方法。具体地公开了氨基酸序列是SEQ ID No.1的重组蛋白100K (672-1053）、及其作为检测抗原在制备用于检测FAdV-4的产品中的应用。本发明还公开了 FAdV-4抗体检测试剂盒及ELISA检测方法。本发明的重组蛋白与FAdV-4阳性血清特异性结合，具有良好的反应原性，利用该重组蛋白建立的检测试剂盒与方法特异性强，无交叉反应，灵敏度高，重复性好，同时可区分灭活苗免疫和自然感染产生抗体的动物能够鉴别FAdV-4感染，为FAdV-4的净化提供技术支持，为HHS疫病的防控提供可靠、有效的手段。