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(发明专利)一种用于圆圈病毒人源 1 型实时荧光 RAA 检测的引物探针组合及其应用(ZL202410922099.4)

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 圆圈病毒人源1型(Gyrovirus homsa1GyH1是继鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virusCIAV)后新发现的第三位环形病毒,属于指环病毒科(Anelloviridae)环病毒属(Gyrovirus)成员。GyH1感染多在鸡群中发现且常以混合感染形式出现,病鸡主要表现为精神沉郁、鸡体瘦小和腺胃明显肿大,病理组织学检查可观察到腺胃浆液性炎症,血涂片观察呈贫血像,是引起鸡传染性腺胃炎疾病的重要病原。目前尚无GyH1感染的有效治疗措施,也暂无针对GyH1感染的商品化疫苗。

 在GyH1的临床检测以及流行病学研究中,免疫学诊断有间接ELISA方法、双抗体夹心ELISA方法和胶体金免疫层析试纸条检测方法,分子检测技术有常规PCR检测及实时荧光定量PCR检测。由于GyH1缺乏细胞培养繁殖系统PCR已被用作检测GyH1感染的最主要方法。目前常规PCR检测广泛用于实验室检测,但该方法的检测结果特异性不够好,存在假阳性,常需要配合DNA测序来验证;而实时荧光定量PCR检测对仪器设备要求高,仅局限于实验室且检测时间长,不适用于基层病原检测。因此需尽快完善相关检测技术研究,建立更加快速、灵敏、特异的检测方法,监测GyH1感染情况,保护家禽养殖业健康发展。

 本发明公开了一种用于圆圈病毒人源1型实时荧光RAA检测的引物探针组合及其应用,涉及生物检测技术领域。该引物探针组合包括上游引物F4、下游引物R1和探针P;所述上游引物F4的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示;所述下游引物R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示;所述探针P的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。利用该引物探针组合可以实现对圆圈病毒人源1型的实时荧光RAA检测,具有操作快速、灵敏性高和特异性强的优势。本发明为准确快速检测GyH1提供了新的技术手段。